9. Calcul de Rf (retarding factor ou rapport frontal).

di : distance parcourue par le composé (mesuré au centre de la tache)

ds : distance parcourue par le front du solvant

10. Description d’une analyse par CCM selon l’ordre chronologique.

CHROMATOGRAPHIE SUR COUCHE MINCE

Préparation de la cuve chromatographique.

– Introduire l’éluant ou le mélange de solvants.

– Ajuster le niveau à environ 0,5 cm du fond de la cuve.

– Garnir l’intérieur de la cuve d’un papier filtre imprégné d’éluant et plaqué contre les parois ; une ouverture est ménagée dans le filtre pour observer le développement du chromatogramme.

– Fermer le récipient (la cuve doit être saturée de vapeur de solvant)

Dépôt de l’échantillon sur la plaque.

– Procéder au nettoyage de la plaque si nécessaire.

– Dissoudre l’échantillon dans un solvant approprié en solution de 2 à 5 % .

– Déposer environ 0,5 ml de la solution en un point situé à 1 cm de l’extrémité inférieure de la plaque; le diamètre de la tache doit être d’environ 2 mm pour la disposition de plusieurs produits.

– Sécher à l’aide d’un séchoir ; éventuellement faire de nouvelles applications.

Développement du chromatogramme.

– Placer la plaque dans la cuve en position verticale.

– Refermer le récipient qui ne doit plus être déplacé.

– Lorsque le front du solvant se trouve à environ 1 cm de l’extrémité supérieure de la plaque, la retirer et marquer cette position. (le trait peut être tracé à l’avance et servir de repère pour arrêter l’élution).

Révélation et calcul de Rf.

– Sécher la plaque à l’aide d’un séchoir

– Révéler les taches sous une lampe U V

– Cercler les taches et pointer leur centre.

– Calculer les Rf