1 Les grandeurs de rétention

1.4 Dosage par la méthode de normalisation interne

Méthode par normalisation interne

La méthode est proche de l’étalon interne. Ici au lieu de rajouter un étalon on choisit comme étalon interne un des composés du mélange que l’on dose. Le raisonnement est identique à l’étalon interne.

x_i = m’_i/∑ m’_i = K_i/jA’_i / ∑K_i/jA’_i

Autre méthode de dosage par référence interne

On réalise une droite d’étalonnage en réalisant des solutions de concentration différentes en élément à doser et en ajoutant au mélange un volume constant d’étalon.

Dosage par étalonnage interne Méthode de l’étalonnage interne

Le principe consiste à comparer les surfaces des pics du mélange avec un étalon pris comme référence. On réalise 2 chromatogrammes : le 1er pour déterminer les coefficients de proportionnalité, le 2nd pour le dosage.
On réalise le 1er mélange avec des concentrations connues en élément à doser auquel on rajoute l’étalon (e).

On a :

- m_e = K_eA_e

- m₁ = K₁A₁

- m₂ = K₂A₂

m₁/m_e = K₁/K_e . A₁/A_e m₁/me = K_1/e. A₁/A_e

Tout étant connu, on peut déterminer K_1/e = K₁/K_e qui est le coefficient de proportionnalité relatif de 1 par rapport à "e".

Pour le dosage, on ajoute un volume connue d’étalon au mélange à analyser. Le chromatogramme obtenu permet d’en déduire les fractions massiques du mélange.

m’_i/m’_e = K_i/e A’_i/A’_e

Le choix de l’étalon est essentiel :

- il doit être bien séparé des autres constituants du mélange
- son temps de rétention et sa concentration doivent être proches des éléments dosés

- il ne doit pas réagir avec les constituants du mélange

Dosage par étalonnage externe

Méthode de l’étalonnage externe

On injecte successivement un même volume d’une solution étalon (concentration en élément à doser connue C_ref) et la solution à doser (concentration inconnue C_i). On compare ensuite les chromatogrammes pour en déduire la concentration.

On a m_ref= K. A_ref et m_i = KA_i m_ref/m_i = A_ref/A_i

En remplaçant la masse par la concentration massique :

C_refV_ref/C_iV_i = A_ref/A_i

Les volumes étant égaux, on obtient C_i = C_ref.A_i/A_ref

Inconvénient de la méthode de l'étalonnage externe : il faut être sûr d’injecter le même volume.